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實時熒光定量PCR儀是DNA定量技術的一次飛躍
發布時間:2019-05-22   點擊次數:104次
    實時熒光定量PCR儀是DNA定量技術的一次飛躍。運用該項技術,我們可以對DNA、RNA樣品進行定量和定性分析。定量分析包括絕對定量分析和相對定量分析。前者可以得到某個樣本中基因的拷貝數和濃度;後者可以對不同方式處理的兩個樣本中的基因表達水平進行比較。除此之外我們還可以對PCR産物或樣品進行定性分析:例如利用熔解曲線分析識别擴增産物和引物二聚體,以區分非特異擴增;利用特異性探針進行基因型分析及SNP檢測等。目前實時熒光PCR技術已經被廣泛應用于基礎科學研究、臨床診斷、疾病研究及藥物研發等領域。其中主要的應用集中在以下幾個方面:
    DNA或RNA的絕對定量分析。包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動植物拷貝數的檢測,RNAi基因失活率的檢測等。
    基因表達差異分析。例如比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等),特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA或差顯結果的确證。
    基因分型。例如SNP檢測,甲基化檢測等。
    熒光定量PCR儀對病原體檢測和遺傳是怎樣的應用?
    病原體檢測:
    目前,采用熒光定量PCR儀檢測技術可以對淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類乳頭瘤病毒、單純疱疹病毒、肝炎病毒、結核杆菌、細小病毒B19、EB病毒和人巨細胞病毒等病原體進行定量測定。與傳統的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優點。
    遺傳及優生優育診斷:
    到目前為止,人們對遺傳性物質改變引起的遺傳性疾病還無法治療,隻能通過産前監測,減少病嬰出生,以防止各類遺傳性疾病的發生,如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,用實時熒光定量PCR檢測其Y性别決定區基因是一種無創傷性的方法,易為孕婦所接受。例外還可以通過實時熒光定量PCR對孕婦弓形蟲,梅毒等檢測,這對找出不明原因流産和習慣性流産的病因提供有力的幫助,大大提高優生優育。
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